熒光是生物和分析顯微鏡中常用的物理現象之一，主要是因為它具有靈敏度高、特異性強的特點。當高能量短波長的光線激發某種物質時，高能量的光子與物質中電子碰撞，使得電子從基態躍遷到激發態。激發態的電子不穩定，會回落到基態，這個過程中會消耗部分熱能，并發出新的光子。新的光子能量比激發的光子能量低，因此波長更長。這就是熒光效應，也就是熒光顯微鏡看到的熒光圖像的原理。

熒光顯微鏡在使用時需要根據濾色片鏡組的激發光譜特性選擇合適的熒光染料，允許用戶決定單個分子種類的分布、數量及其在細胞內的位置，可以實現共區域化和相互作用的研究，離子濃度以及觀察細胞內間的胞吞和胞吐過程，可以成像亞分辨率結構。今天咱們來了解下熒光顯微鏡中激光鏡可選擇的聚光器都有什么區別：

①明視野聚光器

 一般多用明視野聚光器，它具有聚光力強，使用方便，特別適于低、中倍放大的標本觀察。

 ②暗視野聚光器

 暗視野聚光器在該設備中的應用日益廣泛。因為激發光不直接進入物鏡，因而除散射光外，激發光也不進入目鏡，可以使用薄的激發濾板，增強激發光的強度，壓制濾板也可以很薄，因紫外光激發時，可用無色濾板（不透過紫外）而仍然產生黑暗的背景。從而增強了熒光圖像的亮度和反襯度，提高了圖像的質量，觀察舒適，可能發現亮視野難以分辨的細微熒光顆粒。

 ③相差熒光聚光器

 相差聚光器與相差物鏡配合使用，可同時進行相差和熒光聯合觀察，既能看到熒光圖像，又能看到相差圖像，有助于熒光的定位準確。一般熒光觀察很少需要這種聚光器。